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蛋白水平检测&互作验证
更新时间:2022-07-07 15:53:24    点击:81次

一、蛋白免疫印迹检测服务(Western blot)


二、免疫共沉淀检测服务(Co-IP)

在非变性条件下裂解细胞,蛋白质之间的相互作用还可以保持。在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose微珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样的一种复合物:目的蛋白-兴趣蛋白-抗兴趣蛋白抗体-SPA/Agarose,因为SPA/Agarose比较大,这样复合物在离心时就被分离出来。经蛋白上样缓冲液变性煮沸,复合物四组分又被分开。然后经WB试验,用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。

三、pull  down检测服务

Pull down技术的基本原理是将一种蛋白质固定于某种基质上(如Sepharose),但细胞抽提液经过该基质时,可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附,而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或洗脱条件而回收下来。通过pull down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外转录或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。

三、酵母单杂与酵母双杂检测服务

四、双分子荧光互补检测服务(BIFC)

五、亚细胞定位检测服务 

六、luc

免疫共沉淀检测服务()

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